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采用氧糖剝奪(OGD,Oxygen-Glucose Deprivation)方法建模
將HL-1心肌細胞缺血缺氧處理:棄去細胞正常培養液,PBS清洗2-3遍,向培養板中加入含無糖無血清的DMEM培養液(自購,缺氧之前將正常DMEM培養基放人三氣培養箱中用95%N2和5%O2平衡30min,降低培養基中氧的含量)。將細胞置于事先已通氣95% N2、5% CO2或94% N2、1% O2、5% CO2的缺氧裝置中,進行缺氧處理。
恢復培養:OGD處理6h后,將細胞轉移至含有HL-1細胞培養基的正常條件下(37°C、5% CO?)繼續培養。
對照組(Control Group):對照組細胞沒有接受OGD處理,僅在常規培養條件下(37°C、5% CO?,含血清培養基)進行培養,以保持正常生長狀態。
A. MSC鏡下圖 | B. HL-1鏡下圖 | C. OGD后HL-1鏡下圖 |
E. OGD后MSC與HL-1共培養鏡下圖 | F. OGD/R12h后MSC與HL-1共培養鏡下圖 |
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